Citología, Biopsias y Autopsias: técnicas de prelievo y análisis citológico

Citologías

Es el diagnóstico morfológico basado en los caracteres microscópicos de células y componentes extracelulares desprendidos de los órganos espontáneamente u obtenidos por otros procedimientos.

El objetivo básico de la citología es diferenciar entre una población celular normal, una respuesta citológica inflamatoria y una población celular neoplásica. Se suele obtener de forma rápida, fácil y poco agresiva, permitiendo establecer un diagnóstico.

Los objetivos son:

• Colaboración en el diagnóstico y tipificación de neoplasias malignas, viendo las alteraciones morfológicas del núcleo, citoplasma y relaciones entre las células.
• Diagnóstico específico de algunas lesiones benignas (tumores, hiperplasias o infecciones virales o micóticas).
• Elección de pacientes que deben ser estudiados más profundamente en gruposde alto riesgo para un tipo concreto de cáncer.

Tipos de Citologías

Citología Exfoliativa

Recoge material desprendido espontáneamente o de forma inducida, de la superficie de los órganos para su estudio citológico. En distintas muestras podemos encontrar células exfoliadas procedentes de la mucosa: en los esputos, en las muestras de exudados respiratorios o digestivos, etc. En otros casos es necesario aplicar técnicas para que se desprendan células:

• EXFOLIACION POR RASPADO: se raspa la superficie para obtener células. Es elmás usado (cuello de útero y mucosa oral).
• EXFOLIACION POR CEPILLADO: se cepilla la superficie para obtener células. Seutiliza principalmente para obtener muestras en bronquios y endocérvix.

Ambas técnicas se pueden efectuar de forma directa o mediante endoscopia, dependiendo de la localización. También se usan para otras pruebas como recuentos celulares, estudios microbiológicos o estudios de acción hormonal (en el caso de vagina y endometrio).

Campus Formación Rama Sanitaria 1U.D. 8: CITOLOGÍA, BIOPSIAS Y AUTOPSIAS 1 Endocervical Brush 2 Cotton Swab Wooden Ayre Spatula 3 Plastic Ayre Spatula 4 Cervex "Broom" 5 Cytoprep Instrument 6

Citología de Líquidos Biológicos

Se basa en separar las células que hay en líquidos orgánicos para estudiarlas tras una centrifugación. Las formas en las que se obtienen los líquidos pueden ser:

• PUNCIÓN: en el caso de líquidos naturales (LCR, pleural, peritoneal, pericárdico, ... ) o de líquidos de origen patológico acumulados en alguna zona del organismo.
• LAVADO Y ASPIRACIÓN: es una técnica habitual para obtener células de la mucosa bronquial. Se hace por endoscopia, irrigando y luego aspirando comoya hemos visto.
• RECOGIDA DIRECTA: es el caso de la orina. Se puede realizar una citología a partir de muestras de micción espontánea. Se pueden detectar células procedentes de neoplasias del tracto urinario.

Impronta

Es una técnica que se basa en poner en contacto directo un tejido con un portaobjetos para obtener una muestra de células adheridas. Se hace durante intervenciones quirúrgicas y se observa al microscopio en el mismo quirófano. Se usa en tejidos con pocos nexos de unión como son los hematopoyéticos (médula, bazo y ganglios linfáticos).

En operaciones para extirpar tumores se suele hacer alguna impronta a algún ganglio próximo para ver si se ha extendido a través del sistema linfático.

Punción-Aspiración por Aguja Fina (PAAF)

Es un procedimiento para obtener muestras para citología de masas sólidas o quísticas mediante un procedimiento de punción y aspiración. Se usa en órganos superficiales como las mamas, tiroides o ganglios linfáticos.

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Citología Vaginal o Papanicolaou

Es una prueba para la detección de cáncer cervicouterino (supone el 3.7 % de todos loscánceres femeninos). Gracias al efecto combinado del cribado o screening, junto con eltratamiento desde las primeras fases de la enfermedad, la mortalidad de este tipo de cáncer ha disminuido significativamente en los últimos años.

Esta técnica se basa en la obtención por raspado de células del cuello del útero y del exterior para su estudio citológico. El objetivo es poder ver los cambios celulares en lasfases iniciales de un cáncer y de esta forma iniciar un tratamiento precoz.

El inventor de esta prueba fue Georgios Papanicolaou, médico grieto nacido en 1883.

Materiales para la Obtención de la Muestra

• Guantesdesechables.
• Mesa de exploración ginecológica o camilla.
• Espéculo vaginal desechable.
• Espátula de Ayre.
• Cepillo colector endocervical.
• Portaobjetos.
• Fijador en aerosol o alcohol de 96°.

Procedimiento de la Citología Vaginal

• La toma de la muestra debe hacerse sin aseo vaginal previo.
• Hay que verificar los datos de la solicitud y rellenar formulario (última regla, motivo del estudio, antecedentes ginecológicos, número de embarazos, tratamientos hormonales, ... ).

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• Se le debe pedir a la paciente que se coloque en posición ginecológica.
• Colocar luz con un COLPOSCOPIO e inspeccionar la zona perineal buscando secreciones, sangrado, cicatrices o irritación.
• Separar los labios, colocar el espéculo sin lubricantes (como mucho agua o solución salina) a través del canal vaginal en un ángulo de 45°, cuando haya entrado hasta la mitad del mismo, giramos el espéculo 45° volviendo a laposición inicial, lo introducimos un poco más y abrimos las valvas para localizar el interior del cuello uterino. Una vez visualizado, ajustamos el tornillo y lo aseguramos para que las manos queden libres y poder trabajar.
• Inspeccionamos las características del cuello del útero (forma, tamaño, color, erosiones, pólipos, desgarros, ... ), y de la mucosa vaginal (color, irritaciones y secreciones)
• Se realiza una triple toma:
  • Primera: con la espátula se toma una muestra vaginal que se extiendeen la primera porción del portaobjetos, la más próxima a la zona de la identificación y en sentido perpendicular al portaobjetos.
    • Si se quieren evaluar las hormonas: la muestra se toma de la cara lateral de la vagina.
    • Si se hace un diagnóstico de infección: la muestra se toma del fondo del saco vaginal.
  • Segunda: con la espátula se toma una muestra de exocervix que se extiende en el centro del portaobjetos, paralela a la primera.
  • Tercera: con escobillón se toma una muestra endocervical que se extiende en la tercera porción del porta, perpendicular a las anteriores.

G Figura 17. Triple toma de citología cervical.

. Inmediatamente se fijan con spray o con alcohol de 96° durante 10 minutos y se envían al laboratorio para teñirlas y observar las células al microscopio.

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• En la actualidad se usa la CITOLOGÍA EN BASE LÍQUIDA (LBC): La muestra se transfiere justo tras la obtención, a un recipiente que contieneun medio de conservación. Las células se dispersan en el líquido y en el laboratorio se recuperan por centrifugación, se depositan en una lámina, se tiñen y se observan al microscopio.

Citología por Punción-Aspiración por Aguja Fina (PAAF)

Mediante esta técnica se pueden obtener muestras de:

• LESIONES SUPERFICIALES PALPABLES:
  • Las muestras se pueden obtener en la consulta del médico o en radiología, usando una aguja fina normal.
  • Se usa frecuentemente para el diagnóstico diferencial entre lesiones benignas y cáncer, en casos de quistes y nódulos superficiales.
  • Los órganos a los que se aplica esta técnica con más frecuencia son las mamas, tiroides, ganglios linfáticos, piel, próstata, glándulas salivales y tejidos blandos.
• LESIONES PROFUNDAS NO PALPABLES PERO VISUALIZABLES POR TÉCNICASDE IMAGEN:
  • La toma de muestra se realiza mediante control por ecografía o TAC,usa agujas especiales y se prefiere a una biopsia por ser menos agresiva.
  • Los órganos donde más se aplica esta técnica es en pulmones, hígado, páncreas, riñón y ovario, para el diagnóstico diferencial entre lesiones benignas y malignas.
  • Es necesario que no haya problemas de coagulación.
  • En pulmones se puede producir neumotórax (entrada de aire a la cavidad torácica).

Indicaciones Diagnósticas de PAAF

Entre las principales indicaciones diagnósticas destacan:

• Determinar si una modificación es tumoral o no.
• Saber si el tumor es benigno o maligno.
• Identificar recidivas tumorales y metástasis.
• Establecer el estado de una neoplasia.

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Obtención de Muestras en PAAF

Una citología por punción aspiración está formada por cuatro fases:

1. Palpación o localización por técnicas de imagen.
2. Punción: por lo general 3 punciones en cada tumoración en distintas zonas y a distintas profundidades, con el fin de asegurar material suficiente y representativo de toda la masa tumoral.
3. Preparación de los frotis con extensión directa o centrifugación previa.
4. Estudio microscópico.

Materiales: Se necesita aguja, jeringuilla y tirador.

La jeringuilla se acopla dentro del tirador, que permite obtener el vacío en el cuerpo dela jeringuilla accionándolo con una sola mano, de forma que la otra queda libre para inmovilizar el tumor o cuando es necesario, el ecógrafo.

Estudios de PAAF

Las extensiones se tiñen y se observan al microscopio para estudiar la morfologia delas células, las tinciones más habituales en citologías son:

• PAPANICOLAOU (PAP)
• MAY-GRUNWALD-GIEMSA (MGG)
• HEMATOXILINA-EOSINA (HE)

La selección depende del órgano que se va a estudiar y de los protocoles establecidos en cada caso.

Además de la observación citológica, con el material obtenido se pueden realizar pruebas complementarias de:

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• CITOQUÍMICA: estudia la composición química de la célula y sus procesos biológicos mediante análisis químicos y físico-químicos. Aplicamos tinciones como PAS, Azul de Prusia, o Rojo congo.
• INMUNOCITOQUÍMICA: localiza moléculas en los tejidos mediante el uso de anticuerpos.
• CITOMETRÍA DE FLUJO: usa luz láser para recuento y clasificación de células según su morfología o la presencia de biomarcadores.
• MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA: permite mayor detalle que la microscopia óptica.
• CITOGENÉTICA: estudia la estructura, funcion y comportamiento de los cromosomas.

Contraindicaciones y Complicaciones de PAAF

Para realizar la punción de un órgano profundo es necesario que la sangre coagule correctamente, ya que una mala coagulación podría provocar una hemorragia interna. Otro problema es cuando no se puede asegurar la colaboración del paciente, es imprescindible que permita una correcta palpación previa y que se mantenga muy quieto en el momento de realizar la punción y hasta que recuperemos la aguja, ya que un movimiento brusco o violento puede provocar lesiones potencialmente graves según la zona que se trate. Por ello es posible que no se pueda realizar la técnica en niños, pacientes psiquiátricos o ancianos deteriorados.

Las complicaciones pueden ser:

• Síncope vasovagal. Para ello se recomienda hacer punciones con el paciente tumbado.
• Sangrado y formación de hematoma local. Para reducirlo, se debe aplicar presión sobre el punto de punción durante unos minutos tras extraer la muestra.
• En punciones pulmonares son frecuentes los neumotórax, es decir, la entrada de aire entre la pared torácica y la superficie pulmonar.
• En las distintas punciones se puede hacer una punción accidental de otras estructuras, como asas intestinales o vasos importantes.

Punción de Mama

La PAAF de mamas es una técnica muy importante debido a la elevada frecuencia de las patologías mamarias y a la elevada malignidad que presentan. Los criterios que se tienen en cuenta para realizar una PAAF son variados, en principio se puncionan los nódulos cuyo diagnóstico se duda. Además de las instrucciones generales de unapunción, tendremos en cuenta:

. Se necesita una mamografía previa.

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