Detección de Autoanticuerpos en enfermedades autoinmunes, Universidad

UNIDAD 4

DETECCIÓN DE AUTOANTICUERPOS

En el medio ambiente existen microorganismos que, para prosperar, necesitan introducirse en nuestro cuerpo. Sin embargo, habitualmente no sufrimos la enfermedad. Esto lo evita el sistema inmune. Hay ocasiones que el sistema inmune no actúa correctamente, atacando a nuestro propio organismo y desarrollando enfermedades llamadas autoinmunes que requieren un tratamiento prolongado y que son de difícil curación.

En este capítulo vamos a ver cuáles son los tipos de enfermedades autoinmunes más importantes, los anticuerpos que las provocan, así como las técnicas para su detección.

OBJETIVOS

En esta unidad se trata de ver ...

• El Sistema Inmunológico y su funcionamiento. Autoinmunidad. Mecanismos de control: tolerancia inmunológica, redes idiopáticas, linfocitos T8 supresores.
• Enfermedades autoinmunes y los distintos factores que influyen en su desarrollo: factores genéticos, factores ambientales y factores hormonales.
• Enfermedades autoinmunes (EAI) órgano específicas y sistémicas.
• Que son los anticuerpos órgano específicos y enfermedades autoinmunes que produce: Diabetes mellitus tipo 1, Miastenia gravis, tiroiditis de Hashimoto, Cirrosis biliar primaria, Enfermedad de Graves, Enfermedad de Goodpasteure, Anemia perniciosa, etc.
• Que son los anticuerpos no organoespecíficos: Anticuerpos Antinucleares (ANA), anticuerpos antihistonas, anticuerpos anti-ADN, anticuerpos anti-ENA, anticuerpos anticentromero, factor reumatoide y factor anti-CCP.
• En que consisten las técnicas de determinación de anticuerpos por inmunofluorescencia: Método directo o primario y métodos indirecto o secundario. Patrones de fluorescencia.
• En qué consiste y como se realiza el método de determinación de anticuerpos mediante ELISA, procedimiento y tipos: directo, indirecto y Sándwich.

1. AUTOINMUNIDAD

1.1. CONCEPTO

El sistema inmunitario es el encargado de la defensa del organismo. Esta labor la realiza mediante diferentes mecanismos que atacan y neutralizan a las sustancias extrañas a nuestro organismo como pueden ser bacterias, virus, tóxicos, células cancerígenas, etc.

Cuando el sistema inmunológico falla y no puede distinguir a las células propias de las ajenas, las ataca por error ocasionando la autoinmunidad.

Las enfermedades autoinmunes se caracterizan por la existencia de autoanticuerpos o de linfocitos T autorreactivos. Los fagocitos no suelen estar implicados en la respuesta autoinmune.

1.2. MECANISMOS DE CONTROL QUE EVITAN LA APARCICIÓN DE LA AUTOINMUNIDAD

Tolerancia inmunológica: Es la falta de capacidad del organismo para producir una respuesta específica ante un antígeno, propio (auto antígeno) o extraño, provocada por el contacto previo con dicho antígeno.

Los antígenos que llevan al estado de tolerancia son los tolerógenos, en contraposición de los que producen la respuesta inmune (inmunógenos). La tolerancia se desarrolla de forma natural. Cuando el sistema de auto tolerancia falla, es decir se produce una incapacidad para responder ante las propias células, se produce las llamadas enfermedades autoinmunes.

La tolerancia inmunológica a los componentes propios es adquirida, generalmente en la época fetal o primeros días de vida.

Redes idiotípicas. Un idiotipo es la región de los anticuerpos que varía de acuerdo a las características del invasor .Frente a estos idiotipos se forman los anticuerpos anti- idiotipos que interaccionan con los idiotipos formando las redes idiotípicas. La teoría de las redes iditípicas la formuló Jerne, que afirmaba que la existencia de un entramado idiotipo-antidiotipo tiene una importante función reguladora de la respuesta inmunitaria.A·j- (AB-2) 7 Rede ifictipica Artigono 1 7 1 Anticorpo Art- Artigono (AB-1) (AB-3) Rode idiot pica Fuente: https://www.scielo.br

Linfocitos T8 supresores. Tienen la función de frenar la respuesta inmunitaria y así evitar los daños que se podrían ocasionar al organismo, si la respuesta fuera mayor.

1.3. FACTORES DESENCADENANTES DE LA RESPUESTA AUTOINMUNE

Una de las propiedades fundamentales del sistema inmune es su capacidad de discriminar entre antígenos propios y extraños. Cuando se altera este mecanismo de control, se pueden producir anticuerpos o células T efectoras autorreactivas que originarán las denominadas enfermedades autoinmunes.

Existen individuos sanos donde se pueden encontrar autoanticuerpos a títulos bajos a consecuencia de un hecho fisiológico, por lo que la presencia de autoanticuerpos no es indicadora de enfermedad autoinmune.

Existen diversos factores que pueden influir en la aparición de estas enfermedades:

• Factores genéticos: En el desarrollo de las enfermedades autoinmunes, aunque no todas son genéticas, si se necesita una predisposición genética para que se originen. Ciertas combinaciones de genes muestran un mayor riesgo de desarrollar una enfermedadautoinmune que otras. Se ha detectado en muchas enfermedades autoinmunes la presencia de determinadas moléculas de HLA (antígeno leucocitario humano). Entre ellas están: Ciertas combinaciones de genes muestran un mayor riesgo de desarrollar una enfermedad autoinmune que otras.

• HLA B27: Está presente en las siguientes enfermedades autoinmunes: síndrome de Reiter, espondilitis, enfermedad intestinal crónica.
• HLA DR2: esclerosis múltiple
• HLA DR3: enfermedad de Graves, algunos tipos de celiaquía.
• HLA DR3 y DRA4: diabetes mellitus tipo I
• HLA B27: pénfigo
• HLA DR4 DRW 10: artritis reumatoide
• HLA A1, B6 y DR2, DR3, DR3: Lupus.M Fuente: https://www.flickr.com/photos/gemmerich/7445337412
• Factores ambientales:

• Infecciones: Se puede desarrollar una enfermedad autoinmunes tras una infección por Streptococus pyogenes, como por ejemplo en friebres reumáticas y glomerulonefritis.
• Fármacos: Ciertas enfermedades autoinmunes se relacionan con la administración de medicamentos, como en el caso del lupus, inducido por isoniazida, procainamida, etc, o la miastenia gravis que se relaciona con la administración de penicilina. Fuente:https://pixabay.com/es/remedios-medicamentos-tabletas- 423831/
• Alimentación: Como ocurre con el gluten en la enfermedad celiaca. Fuente: https://pixabay.com/es/campo-de-trigo-trigo-maizal-2157207/
• Factor sexo: Generalmente se presentan más casos de enfermedades autoinmunes en mujeres que en hombres. El LES es nueve veces más frecuente en mujeres que en hombres. Probablemente la razón se deba a factores hormonales.
• Factores hormonales:Se ha demostrado la existencia de correlación entre los niveles de estrógenos y el desarrollo e intensidad de enfermedades autoinmunes.
• Factores de patología linfocitaria: Las patologías linfocitarias suelen ir acompañadas de procesos autoinmunes.
• Factor edad: Las enfermedades autoinmunes suelen debutar en adultos jóvenes o de mediana edad probablemente debido a que el sistema inmunitario pierde autocontrol a medida que envejece e individuo.

2. ENFERMEDADES AUTOINMUNES Y ANTICUERPOS ASOCIADOS

Como hemos visto anteriormente, la enfermedad autoinmune está causada por el ataque del sistema inmunitario a las a las células del propio organismo. Es una respuesta inmune extrema. Una enfermedad autoinmune puede causar la destrucción de tejido del cuerpo, cambiar el funcionamiento de órganos, crecimiento normal de un órgano, etc.

Generalmente las enfermedades autoinmunes comienzan con la activación de los linfocitos T autorreactivos y la deficiencia de los mecanismos de autotolerancia inmunológica.

Podemos diferenciar dos patrones de enfermedad autoinmunitaria:

Enfermedades organoespecíficas. Estas enfermedades está causadas por el ataque del sistema inmunitario a órganos determinados del organismo y pueden existir o no autoanticuerpos exclusivamente dirigidos a ese órgano.

Entre ellas destacan:

• S. Endocrino: Diabetes mellitus tipo 1.
• Neuromuscular: Miastenia gravis.
• Titoides: Tiroditis de Hashimoto.
• Hepatobiliar: Cirrosis biliar primaria.
• Piel: Alopecia autoinmune
• Sangre: Anemia perniciosa
• Digestivo: enfermedad de Chron

Enfermedades sistémicas. Afectan a muchos tejidos del cuerpo y a varios sistemas a la vez, incluyendo varios órganos. Ni las lesiones ni los autoanticuerpos son específicos de un órgano.

Destacan entre otras:

• Lupus eritematoso sistemico: lesiones del tejido conectivoArtritis reumatoide.
• Esclerodermia.
• Polimiostis.
• Dermatomiostis.
• Síndrome de Sjögren.
• Sarcoidosis
• Vasculitis

2.1 ANTICUERPOS MÁS COMUNES EN LAS ENFERMEDADES AUTOINMUNES]

2.1.1 ANTICUERPOS ANTINUCLEARES (ANA)

Los ANA son un grupo heterogéneo de anticuerpos dirigidos contra autoantígenos localizados en el núcleo y citoplasma de la célula (mitocondrias, aminocil-ARNt sintetasa, Jo1, etc). Los anticuerpos que reconocen antígenos tanto en el núcleo como en el citoplasma son hallados en un solo sustrato antigénico, las células HEp-2 y los dos se significan como ANA.

Recientemente se ha propuesto llamarlos anticuerpos anticelulares puesto que van dirigidos tanto al núcleo como a orgánulos citoplasmáticos.

Detección: habitualmente se hace mediante IFI para la detección simultánea de autoanticuerpos. Para la identificación de autoanticuerpos individuales se utiliza e ELISA.

Los anticuerpos ANA pueden aparecer en personas que no padezcan enfermedad autoinmune. Pueden aparecer en:

• ANA naturales que no se asocian a manifestaciones clínicas. Se presentan preferentemente en niños y mujeres, personas mayores (títulos relativamente altos). No se conoce el estimulo antigénico que origina su síntesis.
• En infecciones y parasitosis. Los títulos disminuyen cuando desaparece el estímulo antigénico.
• Víricas: virus de inmunodeficiencia humana, hepatitis C, virus de Epstein-Barr, etc.
• Bacterianas: Lepra, tuberculosis, Salmonella, etc.
• En neoplasias: melanoma, cáncer de mama, de pulmón, de riñón, etc.
• Tras el consumo de fármacos como: metildopa, clonicina, fenitoina, etc

Los valores de ANA SON:

• < 1/40 (5Ul/ml): Negativos.
• Entre 1/40 y 1/160: positivos débiles sin repercusión clínica cuando no existan síntomas. Cuando el valor este entre 1/80 y 1/160 hay que hacer un seguimiento del paciente.
• > 1/160 (20UI/ml). Positivos.
• ANTICUERPOS anti DNA Existen dos tipos de anticuerpos reactivos contra el ADN:

• Anticuerpos anti-ADN desnaturalizados, o de cadena sencilla (ssADN), es muy frecuente en pacientes LES y puede ser encontrarse en otras enfermedades autoinmunes como: artritis reumatoide, síndrome de Sjorgren, hepatitis crónica, cirrosis, etc.
• Anticuerpos anti-ADN nativo (dsADN), son los más específicos y fiables para el diagnóstico del LES.
• ANTICUERPOS antihistonas Estos anticuerpos anti-histonas son frecuentes en lupus eritematoso sistémico (LES) (50-70%) y en lupus inducido por fármacos (mayor del 95 %), también pueden aparecer en otras enfermedades reumáticas, esclerosis sistémicas, determinadas infecciones y hasta en un 5% de individuos sanos.

Su utilidad clínica radica en el diagnóstico y seguimiento del LES, especialmente del inducido por drogas, este tipo de LES puede permanecer durante años después de su remisión clínica.

ANTICUERPOS anti-ENA Los anticuerpos extraíbles del núcleo (ENA) se dirigen contra antígenos nucleares no histonas. Comprenden 6 tipos: anti Ro/SSA, anti Sm, anti La/SSB, anti RNP, anti Scl 70, anti-Jo1.

• Ro/SSA: son anticuerpos antinucleares que reconocen proteínas celulares con pesos moleculares de 52 a 60 kd. Puede aparecer en un 10% de personas sanas y aproximadamente el 75-85% en pacientes con síndrome de Sjögren. También se encuentran, aproximadamente en un 50%, en pacientes con LES, esclerosis sistémica progresiva (20%) y artritis reumatoide (10%), y se ha asociado con enfermedad pulmonar intersticial, púrpura, foto sensibilidad y bloqueo cardiaco congénito.
• Sm. El antígeno Smith es una proteína no histona y es el primer auto antígeno proteínico nuclear que se describió en el Lupus eritematoso sistémico. La reacción inmunitaria anti-Sm consiste en la unión de muchos anticuerpos a muchos antígenos proteicos. Se detectan en el 30% de LES y es poco