Análisis hematológico de la serie roja: parámetros y estudio de la anemia

ANÁLISIS HEMATOLÓGICOS

Introducción a la Hematopoyesis

Técnico Superior en Laboratorio Clínico y Biomédico MP. ANÁLISIS HEMATOLÓGICO UD5. - Análisis hematológico de la serie rojaANÁLISIS HEMATOLÓGICOS

1. Introducción Todas las células de la sangre derivan de una célula original o precursor común que es la célula madre. Esta se encuentra en la médula ósea en los adultos. El proceso de formación de las células sanguíneas se denomina hematopoyesis. La célula madre hematopoyética pluripotente o stem cell, es el progenitor más indiferenciado y puede dar lugar a cualquier línea de las células sanguíneas. Se conoce como "unidad formadora de colonias, ufc" o célula madre lonfomieloide (colony forming unit limphoid- myeloid, CFU-LM). Se caracteriza por su gran capacidad proliferativa, diferenciadora y autorrenovadora, gracias a factores estimuladores e interleucinas que se encuentran en el microambiente medular. A partir de la stem cell surge la célula germinal linfoide (CFU- L) y la célula germinal mieloide (CFU-M). A partir de esta última, CFU-M se inicia un proceso diferenciador para progenitores de la línea eritroide (burst forming unit- erythroid BFU-E) hacia la línea megacariocítica (DFU-Meg) y hacia la línea granulocítica- monocítica (CFU-GM).

La diferenciación de la serie eritropoyética se inicia en la BFU-E que se transforma en CFE-E (burst forming unit-erithroid coly forming nit-erytroid) y está en los precursores que ya se conocen al microscopio, como el proeritroblasto; todo el proceso madurativo finaliza en el hematie gracias a la acción de la hormona eritropoyetina (EPO). Este proceso de maduración se desarrolla en tres pasos:

• Un aumento progresivo de la acidofilia celular por incremento de la hemoglobina y la disminución del contenido en ácido ribonucleico
• Pérdida del núcleo
• Desaparición de las organelas citoplasmáticas

El proeritroblasto es de gran tamaño (20-25um), con intensa basófila citoplasmática y contiene un núcleo grande con cromatina laxa y algún nucleolo. En la diferenciación le sigue el eritroblasto basofilo, de menor tamaño (16-18um) y mayor madurez citoplasmática, aunque conserva intensa basófila. Posteriormente se transforma en eritroblasto policromatófilo, de citoplasma gris rosado debido a la hemoglobina que inicia su síntesis y finalmente, en eritroblasto ortocromático (7-10um) de color azul rosado, con mayor contenido en hemoglobina y un núcleo picnótico. Su maduración final consiste en la pérdida del núcleo y su transformación en reticulocito, con capacidad 3 | Página UD5. - ANÁLISIS HEMATOLÓGICO DE LA SERIE ROJAANÁLISIS HEMATOLÓGICOS aún para formar hemoglobina y con ARN en su citoplasma. Antes de madurar completamente a hematie adulto permanece de 2 a 4 días en la médula ósea y un día en sangre periférica.

Estructura y Fisiología Eritrocitaria

2. Estructura y fisiología eritrocitaria El hematie o eritrocito maduro es la célula más madura de la eritropoyesis. Una persona tiene una media de unos 333.200 millones de hematíes en su cuerpo- Las mujeres tienen entre 4,8 y 6 millones de hematíes/mm3 en sangre y los hombres entre 5,4 y 8 millones. Es el elemento celular más abundante de la sangre (cerca del 50% del volumen sanguíneo).

El hematie maduro sobrevive en el torrente sanguíneo una media de 90-120 días antes de ser eliminado. Su función es transportar oxígeno desde los pulmones a través del corazón a los tejidos donde se produce el intercambio por dióxido de carbono que se devuelve a los pulmones. El oxígeno y el dióxido de carbono son transportados por la hemoglobina que contiene una molécula de hierro.

La membrana del hematie está compuesta de una mezcla de lípidos, proteínas y carbohidratos. Entre sus funciones está el mantenimiento de la forma celular y el transporte de nutrientes interior a la célula.

Los hematíes son células anucleadas, de color rosado y de forma redondeada u ovalada, con una depresión en la zona del centro. Si se corta transversalmente se observa que tiene forma de disco bicóncavo de unos 2 um de espesor, con un diámetro de unos 7 um. Esta forma bicóncava le proporciona mayor superficie en relación con su volumen, lo que hace fundamental para asegurar la deformabilidad que les permite pasar a través de la microcirculación y en especial, el filtro esplénico. Debido a su elevada diferenciación, carecen también de organelas citoplasmáticas, estructuras que han sido sustituidas por la hemoglobina, que en solución acuosa ocupa la totalidad del citoplasma. Por lo tanto, la coloración del hematie se debe a la cantidad distribución de la hemoglobina, a su tamaño y forma, que se pone de manifiesto con la tinción en una extensión sanguínea.

4 | Página UD5. - ANÁLISIS HEMATOLÓGICO DE LA SERIE ROJAANÁLISIS HEMATOLÓGICOS La hemoglobina es el componente fundamental del hematie maduro cuya función principal es la oxigenación de los tejidos. Está formada por cuatro subunidades proteicas o globinas, iguales dos a dos, cada una de las cuales se le uno un grupo hemo que contienen un átomo de hierro capaz de unirse al O2 de forma reversible. Existen seis tipos de cadenas globínicas: alfa, beta, gamma, delta, epsilon, zeta. La hemoglobina humana adulta es una mezcla de tres subtipos: HbA1 (dos alfa y dos beta), HbA2 (dos alfa y dos delta) y HbF (dos alfa y dos gamma).

Parámetros de la Serie Roja y Métodos de Determinación

3. Parámetros que evalúan la serie roja: Métodos de determinación. La apreciación del tamaño y el contenido hemoglobínico de los hematíes a partir de la extensión teñida de sangre periférica siempre ha sido uno de los exámenes de laboratorio que más se ha empleado en el diagnóstico de la anemia. Este examen dependía de la subjetividad del observador hasta que en 1930 se introdujo el empleo de los índices eritrocitarios (índices de Wintrobe) que relacionan magnitudes de concentración de hematíes y de hemoglobina y la fracción de volumen sanguíneo eritrocitario. Actualmente, estos índices que antiguamente se obtenían mediante cálculos, se realizan mediante autoanalizadores que utilizan técnicas electrónicas o de conductancia o láser para realizar un recuento rápido y fiable de las células en suspensión: cada célula se cuantifica como un pulso eléctrico al pasar por un sensor y el volumen se calcula por la dispersión que producen.

La concentración de Hemoglobina, se obtienen tras mezclar un volumen de sangre total con un diluyente que lisa los hematíes y liberan la hemoglobina, que se mide por colorimetría: la densidad óptica determina su concentración en cada célula. Además de las cifras eritrocitarias, los autoanalizadores pueden ofrecer citrogramas que representan el volumen eritrocitario y la concentración de HB. Por otro lado, según las reglas de calibración, también ofrecen información de aviso las alarmas o flags que indican valores anormales en los principales índices lo que resulta útil en la investigación de anemia.

Los parámetro o índices más importantes en la serie roja son:

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• Hematocrito (HTO): Es el porcentaje del volumen total de la sangre compuesto por hematies. Antiguamente se media tras centrifugar un tubo capilar (micrométodo), de ahí que la definición de anemia viniera determinada por el descenso del Hto. Actualmente, la OMS define anemia por el descenso de hemoglobina, no de hematocrito, puesto que este depende del volumen plasmático total: un aumento de volumen (hemodilución) llevaría a una falsa anemia y al contrario, un descenso (deshidratación) llevaría a una falsa normalidad en caso de anemia. Los autoanalizadores suministran el valor del hematocrito por un cálculo matemático: dividen el volumen corpuscular medio (VCM) por el número de hematíes: Hto = VCM/nº hematíes. Además, como regla fácil de recordar, la cifra del Hto suele aproximarse a la cifra de Hb multiplicada por 3.
• VCM: Es la media de los volúmenes de cada uno de los hematíes que se miden. Es el índice eritrocitario con más valor clínico ya que constituye un criterio morfológico de clasificación de anemias. El intervalo normal en un adulto se establece entre 80 y 100 fL: esta situación se denomina normocitosis. Puede obtenerse mediante la fórmula matemática: VCM= Hto/nº de hematíes.
• Hemoglobina corpuscular media (HCM): Informa sobre el valor medio del contenido hemoglobínio de los hematíes. No se mide directamente, sino a través del cálculo matemático: HCM= Hb/nº de hematíes.
• Concnetración de HB corpuscular media (CHCM): Es la media de las cocentraciones de Hb de cada uno de los hematíes. Correlaciona el VCM y la HCM entre sí, por lo que sus variaciones son muy pequeñas, a excepción de ciertas situaciones clínicas con incrementos característicos de la CHCM como esferocitosis, hemoglobinopatía C, hiperlipidemia o aglutinación eritrocitaria. Se considera normal una cifra entre 28 y 35 g/dL: se denomina normocromía. Se obtiene mediante el cálculo matemático: CHCM = Hb/Hto. En analizadores que usan tecnología Technicon, la CHCM también 6 | Página UD5. - ANÁLISIS HEMATOLÓGICO DE LA SERIE ROJAANÁLISIS HEMATOLÓGICOS

Valores Normales de Parámetros de Serie Roja (OMS)

Tabla 76-1. Valores normales de los principales parámetros de serie roja según la Organización Mundial de la Salud (OMS)

VCM: volumen corpuscular medio; HCM: hemoglobina corpuscular media.

Datos Adicionales de Interés Clínico

Algunos autoanalizadores pueden ofrecer, además, otra serie de datos de interés clínico:

• Amplitud de distribución eritrocitaria (ADE: red blood cell distribution with RDW): es el coeficiente de variación del histograma de volúmenes. Se considera normal un porcentaje igual a 15%.
• Amplitud de distribución de hemoglobina: (ADH: hemoglobin distribution with HDW): es la desviación de la concentración de Hb. La cifre normal se sitúa en 2,2- 3,2 g/dL.

Los valores normales de los índices eritrocitarios dependen sobre todo de la edad, en menor medida, del sexo.

Puesto que hematíes y plaquetas son de las dos únicas células anucleadas, en algunos autoanalizadores el recuento se realiza en un mismo canal y se las distingue por el tamaño: Las plaquetas más pequeñas (el volumen plaquetario medio suele ser menor a 11 fL). El límite de tamaño para que una célula sea contabilizada como plaqueta es de unos 20 fL, por eso en el caso de las plaquetas sean grandes, macrotrombocitos, la cifra de plaquetas ofrecida por el analizador puede ser menor a la real, ya que las contabiliza como hematíes y al contrario, en caso de fragmentos de eritrocitos en anemias microangiopáticas, puede ofrecer una cifre alta de plaquetas falsa. Ambas situaciones se clarifican con la extensión al microscopio y el analizador, además suele ofrecer también alarmas morfológicas.

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