Muestras de Obtención Directa: Gestión y Análisis de Esputo, Heces y Semen

Índice de Muestras Biológicas

Gestión de muestras biológicas | UNIDAD 6 Muestras de obtención directa

• 6.1. Esputo
• 6.1.1. Obtención de la muestra
• 6.1.2. Procesamiento
• 6.1.3. Composición
• 6.1.4. Análisis de esputos
• 6.2. Heces
• 6.2.1. Recogida de la muestra
• 6.2.2. Preparación del paciente
• 6.2.3. Pruebas y análisis
• 6.3. Semen
• 6.3.1. Recogida y transporte
• 6.3.2. Pruebas y sustancias analizables a partir de muestras de semen

Introducción a las Muestras de Obtención Directa

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Las muestras de obtención directa son aquellas que se recogen directamente del cuerpo por tratarse de secreciones que pro- duce el cuerpo de manera natural. En esta unidad estudiaremos los tres tipos de muestras de obtención directa más populares en el ámbito sanitario, que son el esputo, las heces y el semen. A lo largo de tres puntos de contenido iremos repasando las características de cada una de estas tres sustancias, introduci- remos algunas nociones sobre su naturaleza y aprenderemos los principales métodos de obtención para cada una de ellas. En cada punto concluiremos introduciendo los diferentes tipos de análisis que se realizan a partir de cada tipo de muestra de obtención directa y su aplicación.

Objetivos de la Unidad

Al finalizar esta unidad

• Conoceremos las características de las muestras de esputos, semen y heces en pacientes sanos.
• Aprenderemos cómo obtener mues- tras válidas para el análisis de diferen- tes aspectos relacionados con la salud a partir de heces, esputos y semen.
• Seremos conscientes de qué ele- mentos y parámetros son importan- tes para valorar las muestras de ob- tención directa.
• Sabremos qué medidas deben tomar los pacientes para que las muestras obtenidas en cada caso estudiado sean válidas para su análisis.
• Conoceremos los criterios que debe- remos tener en cuenta para aceptar o rechazar muestras de esputos, heces o semen que lleguen al laboratorio.

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Esputo: Recolección y Análisis

6.1.

Las muestras de esputo son aquellas que contienen el líquido de segregado por los epitelios de los pulmones. Esta sustancia tiene una textura mucosa, entre líquida y sólida y en ella pode- mos encontrar patógenos y células que pueden ayudarnos en el diagnóstico de enfermedades respiratorias.

En este primer punto, aprenderemos a obtener, procesar, carac- terizar y obtener información a partir de muestras de esputo de los pacientes.

Imagen 1. La recogida de esputos por expectoración es poco invasi- va, aunque las muestras obtenidas son de menos calidad

Obtención de la Muestra de Esputo

6.1.1. Obtención de la muestra

Lo primero que debemos tener en cuenta es que para obtener muestras de esputos podemos recurrir a diferentes métodos, dependiendo de las circunstancias y los patógenos que puedan estar implicados. A continuación se describen los más habituales:

• Expectoración espontánea: La muestra se obtiene a partir de esputos, que son expulsados mediante toses y recogidos en botes de muestras para su análisis. Esta manera de obtener muestras presenta el problema de que el origen exacto del esputo es indeterminado (pue- de proceder de bronquios, bronquiolos, alveolos, etc.) y que puede contaminarse fácilmente, al tener que pasar por el interior de la boca en su expulsión. Para reducir la contaminación, es recomendable que el paciente guarde ayunas antes de la toma de muestras y se enjuague la boca con un colutorio. Los estudios que se realicen en muestras obtenidas por expectoración deberán basarse en varias muestras (al menos 3) para poder considerarse válidos.

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• Expectoración postural: Cuando el paciente presenta problemas para expectorar de manera espontánea, pue- de inducirse la expectoración colocándolo boca abajo en una camilla e indicándole que respire intensamente.
• Expectoración inducida: Otra opción a la que se pue- de recurrir cuando existen dificultades para expectorar esputos. En este caso se utilizan aerosoles hipertónicos, que son inhalados por los pacientes, produciendo en el cuerpo tos por la sensación que causan las microgotas al adherirse a las paredes del aparato respiratorio.
• Cepillado bronquial (citología respiratoria): Consiste en utilizar un cepillo especial para realizar un raspado de las vías respiratorias. Esto permite obtener muestras de manera más directa que por los métodos anteriores, en las que es más fácil encontrar células del epitelio respi- ratorio. A partir de este método se pueden realizar frotis directamente o procesar las muestras de otra manera para su observación. Este método es especialmente utilizado para estudios citopatológicos, siendo la segunda muestra más habi- tual, para ellos tras las de citologías ginecológicas.
• Lavado broncoalveolar (BAL): Consiste en la introducción de líquido (normalmente entre 100 y 200 mL) mediante un tubo flexible desde la nariz o la boca para volver a aspirar- lo y con ello obtener una muestra de las vías respiratorias más profundas (bronquiolos y alveolos). ES habitual que esta técnica acompañe a la broncoscopia, que permite ob- servar el estado de los tejidos antes de tomar la muestra.
• Punción aspiración con aguja fina (PAAF): Es la técnica más invasiva de cuantas hemos tratado, ya que consiste en utilizar una aguja para atravesar los tejidos del pecho y obtener una muestra directa del esputo almacenado en los pulmones. Debido a que la muestra es directa, la posibilidad de contaminación es mínima, por lo que las muestras obtenidas son de alta calidad. Sin embargo, esta técnica requiere habilidad para poder realizarse de manera segura, de lo contrario podrían producirse hemorragias, neumotórax o embolización de aire en el paciente, poniendo en riesgo su salud.

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Procesamiento de Muestras de Esputo

6.1.2. Procesamiento

Las muestras de esputo obtenidas mediante cualquiera de los métodos antes indicados pueden observarse directamen- te, pero la información que nos aportarán en este estado es limitada, sobre todo en expectoraciones, que tienen una alta probabilidad de contaminarse.

Los primero que debemos tener en cuenta para procesar las muestras de esputo es su aspecto general, que puede dar- nos algunas pistas de su composición. Un aspecto oscuro con color más o menos pardo puede indicar lesiones que hayan dañado los epitelios causando sangrado.

En la mayor parte de los estudios que se realizan a partir de mues- tras de esputos, es necesario realizar frotis a partir de la muestra, que luego se fijan y se tiñen para facilitar su observación.

El proceso general sigue las si- guientes indicaciones:

• Tomar una alicuota de la mues- tra, colocarla en un portaobje- tos y extenderla.
• Fijar la muestra mediante alco- hol etílico de 95℃ o métodos específicos para lo que se de- see observar.
• Realizar tinciones, que pueden ser diferentes en función del aspecto que se desee evaluar. Para el estudio de las células humanas suelen realizarse tin- ciones de rutina como la de Papanicolau, pero para detectar ciertos patógenos como Myco- bacterium tuberculosis se debe optar por tinciones como la de Ziehl-Neelsen.

Composición del Esputo

6.1.3. Composición

Como técnicos especialistas, debemos conocer los elementos que encontraremos en las muestras de esputo para poder valo- rarlas adecuadamente, lo cual aprenderemos en esta sección.

Lo primero que debemos tener en cuenta es que las mues- tras de esputo están compuestas en su mayor parte por agua (95%), suponiendo el resto de componentes solo una pequeña parte en la que distinguimos entre células epiteliales, células no epiteliales, material no celular y otros elementos (cuerpos extraños y contaminantes y microorganismos). Veamos con algo más de detalle algunos de estos elementos:

• Células epiteliales: Son células procedentes de la su- perficie de los epitelios de las vías respiratorias. Depen- diendo de su origen exacto, tienen un aspecto plano (vías superiores) o cilíndrico (bronquios, bronquiolos, etc). La cantidad excesiva de estas células o su altera- ción morfológica pueden ser indicadores de patologías.
• Células no epiteliales: Son en su mayor parte células del sistema inmunitario entre las que destacan macrófagos, neutrófilos y eosinófilos. La presencia excesiva de estas células está asociada a procesos inflamatorios causados por infecciones o alergias, como indicaremos en la si- guiente sección de este punto.
• Elementos no celulares: Son partículas o fibras que se encuentran habitualmente en el aire y que pueden apa- recer en los esputos. Entre ellos destacan los siguientes:
• Cristales de Charcot-Leyden: Fragmentos cristalizados de membrana de eosinófilos degenerados.
• Espirales de Curschman: Moco espeso que aparece en pacientes con asma o bronquitis crónica.
• Cuerpos de Psamoma: Cristales de minerales (princi- palmente calcio), que aparecen en algunas patologías como la tuberculosis o adenocarcinomas.
• Fibras vegetales y granos de polen.

Imagen 2. Cristal de Charcot-Leyden Imagen 3. Espirales de Curschman. Fuente: www.hmong.es Imagen 4. Cuerpo de Psamoma

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Análisis de Esputos

6.1.4. Análisis de esputos

A partir de las muestras de esputos se pueden realizar distintos tipos de análisis, que dependen de los aspectos que se desean valorar. En la mayoría de los casos, la realización de uno u otro tipo de análisis dependerá de los indicios recogidos en las primeras etapas de la emisión del diagnóstico.

Los análisis de esputos pueden clasificarse en:

• Estudios macroscópicos: Son valoraciones del aspecto general de la muestra, que pueden ser orientativas pero nunca determinantes. Entre los aspectos valorados des- tacan el color, el olor, la consistencia y el aspecto. Como norma general, los esputos de los pacientes sanos son de color claro, naturaleza acuosa e inodoros, pudiendo estar causadas las alteraciones por patologías muy diversas.
• Estudios citológicos: En este caso se valora el tipo, la morfología y la valoración de las células procedentes del mismo cuerpo humano. Este tipo de estudios son de naturaleza más anatomopatológica, pues se centran en alteraciones de las células presentes que pueden estar causadas por infecciones, procesos inflamatorios (como las alergias) o neoplasias. Por otro lado, la valoración de alteraciones celulares re- quiere de tinciones que permitan definir su morfología adecuadamente.
• Estudios microbiológicos: Se centran la detección de la presencia de microorganismos patógenos y su identi- ficación. En el tracto respiratorio es habitual que se den neumonías causadas por diferentes patógenos (Strepto- coccus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Pneumo- cystis jiroveci ... ) o que aparezcan otros patógenos graves pero menos habituales en países desarrollados (Myco- bacterium tuberculosis). Todos estos estudios requieren la realización de tinciones y/o pruebas bioquímicas que permitan visualizar e identificar los patógenos.
• Recuentos celulares: Las infecciones y procesos infla- matorios se caracterizan por aumento en las cantida- des de macrófagos y neutrófilos (sobre todo en infec- ciones) o de eosinófilos (alergias), por lo que para valorar estos aspectos se recurre a recuentos celulares. La va- loración de si la situación es patológica o no, dependerá de índices establecidos por las autoridades sanitarias.

Imagen 5. Spneumoniae vista al microscopio óptico

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