Procesamiento citológico y tisular: preparación de muestras

PROCESAMIENTO CITOLÓGICO Y TISULAR

PROCESADO DE LA MUESTRA

Daniel Brell Martín Ldo. Biología y Bioquímica Ciclo Formativo de Grado Superior en Anatomía Patológica y Citodiagnóstico

INTRODUCCIÓN

Histotecnología -> ciencia que estudia los fundamentos técnicos y la secuencia de manipulaciones necesarias para llevar a cabo el análisis de los tejidos de los seres vivos. Material histológico -> toda muestra de tejidos obtenida de un individuo o animal sano con la finalidad de investigar su estructura y composición normales Material Anatomopatológico -> muestras procedentes de individuos o animales enfermos utilizadas para el diagnóstico o investigación etiológica de la enfermedad. Citotecnología -> rama de la Biología que en lo que concierne a su estructura, sus funciones y su importancia en la complejidad de los seres vivos.

MATERIALES DE USO CORRIENTE EN LABORATORIOS DE ANATOMÍA PATOLÓGICA

Materiales, reactivos y equipos en histotecnología y citotecnología

Materiales

Casete de plástico Recipiente perforado donde se introduce el material seleccionado para ser estudiado por el patólogo.

a b d c a) Bisturí (con hoja desechable); b) Pinzas; c) Tijeras (distintos tamaños); d) Sondas acanaladas

MATERIALES DE USO CORRIENTE EN LABORATORIOS DE ANATOMÍA PATOLÓGICA

-Materiales, reactivos y equipos en histotecnología y citotecnología. Materiales

NE 40x/0,90 mm Ko I BAR Flan- Pian - NEO a) 100 63x/125 2/017 b) a) Portaobjetos; b) Cubreobjetos Mechero de alcohol Ph3APod

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Materiales, reactivos y equipos en histotecnología y citotecnología

Reactivos

• Formol [formaldehído o metanal; CH2O ] -> solución acuosa al 40% de formaldehído, incolora y de olor penetrante y sofocante.
• Xilol [xileno o dimetilbenceno; C6H4(CH3)2 ] -> líquido incoloro e inflamable con un característico olor a tolueno. Alcohol en diferentes proporciones
• Agua destilada
• Parafina -> combinación sólida de hidrocarburos, blanca, translúcida e inodora, de baja densidad (0.8 g/cm3), que funde fácilmente ante una fuente de calor, siendo insoluble en agua, pero sí en éter, etanol caliente, benceno y cloroformo.
• Pegamento especial para unir -> soluble en agua, alcohol o xileno, con un índice de refracción portaobjetos y cubreobjetos próximo al del cristal (ej: Permount, Bálsamo de Canadá, Merkoglas, etc).

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Materiales, reactivos y equipos en histotecnología y citotecnología

Reactivos

Colorantes (más habituales):

• para Histotecnología -> hematoxilínas varias, eosina, Giemsa, etc.
• para Citotecnología -> hematoxilina de Harris, EA50, Orange G, colorantes azul y rojo para técnica de Diff-Quick, etc.

Diferentes reactivos químicos:

• En polvo -> nitrato de plata, ác. fosfomolíbdico, etc. Líquidos -> HCI, H2SO4, etc.

Tejido de pulmón fetal teñido con hematoxilina-eosina

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Materiales, reactivos y equipos en histotecnología y citotecnología

Equipos para Histotecnología

Estación de tallado Mesa especial para tallar, con aspiradores para los vapores generados por el formol, junto con grifos de agua y accesorios requeridos para el tallaje.

Procesador Aparato donde se introducen las muestras de biopsias con el fin de sustituir el agua que contienen por parafina.

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Materiales, reactivos y equipos en histotecnología y citotecnología

Equipos para Histotecnología

OFF High-Heat MELTING Low-Heat TREATMENT Dickson PARAFFIN BATH Since 1924 Estación de parafina / Parafinero Contiene la parafina líquida para hacer los bloques de parafina.

Thermo -. G Microtomo Permite hacer secciones micrométricas de bloques de parafina. Distinguimos entre manual y automático, así como de rotación (o de Minot), de congelación y de deslizamiento.

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Equipos para Histotecnología

-8ºC Bio - Oplica Baño de flotación Contiene agua caliente donde se depositan los cortes de parafina para estirarlos y seleccionar los de mayor calidad.

MEDITE TDO SAHARA /11/11 Estufa Compartimento a tª cte y programable (37 ℃ - 60 ℃) que permite el secado de las preparaciones para que las muestras queden correctamente adheridas.

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Materiales, reactivos y equipos en histotecnología y citotecnología

Equipos para Citotecnología

Laboratory Nabigtratad Conptheys Centrífuga Dispositivo que permite ejercer una rotación de la muestra mediante la fuerza centrífuga generada por aceleración del rotor, obteniendo la separación de sus componentes por sedimentación.

5000 3 Citocentrífuga Consiste en una centrífuga de menor tamaño, diseñada especialmente para seleccionar células contra portaobjetos mediante moldes especiales (Cytospin).

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Materiales, reactivos y equipos en histotecnología y citotecnología

Equipos comunes

0 10 muteva Myr Teñidores Contienen todos los reactivos necesarios para preparar las tinciones que necesitemos. Encontramos automáticos y manuales

O SE To Montadores automáticos Dispositivo automatizado que coloca cubreobjetos sobre portaobjetos que contienen muestras de tejido ya teñidas.

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Uso eficiente de recursos

Eficacia -> capacidad para obtener los resultados esperados independientemente de los recursos utilizados. Eficiencia -> capacidad para lograr un objetivo empleando los mejores medios posibles (reduciendo recursos). Efectividad -> cuantificación del logro de la meta. Conclusión: uso eficaz y racional de los recursos.

Seguridad y prevención de riesgos en el laboratorio

• Ley 31/1995, de 3 de diciembre de 2003, de prevención de riesgos laborales. Identificar los riesgos -> Evaluar los riesgos -> Planificar medidas preventivas. Priorizar la seguridad colectiva frente a la individual.

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Tipos de residuos y procedimientos de eliminación

Clases de residuos sanitarios

• Legislación -> Decreto 83/1999, de 3 de junio, por el que se regulan las actividades de producción y de gestión de los residuos biosanitarios y citotóxicos (modificación de la Ley 10/1998, de 21 de junio, de residuos).

Clasificación de los residuos sanitarios:

• Clase I (Residuos Generales) -> sin contaminación específica ni riesgo de infección asociado (ej: papel, cartón, metals, vidrio, etc).
• Clase II (Residuos Biosanitarios -> todo aquel no clasificado como residuo biosanitario Asimilables a Urbanos) especial o de clase III (ej: sondas, vendajes, gasas, guantes, otros desechables quirúrgicos, bolsas de sangre vacías y, en general, todo material en contacto con líquidos biológicos o en contacto con los pacientes cuyo riesgo de infección está limitado al interior de los centros sanitarios.).

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Tipos de residuos y procedimientos de eliminación

Clases de residuos sanitarios

Clasificación de los residuos sanitarios:

• Clase III (residuos Biosanitarios Especiales) -> incluye los siguientes grupos:
  • Grupo 1 -> residuos de pacientes con infecciones altamente virulentas, erradicadas, importadas o de muy baja incidencia en España (fiebres hemorrágicas, rabia, carbunco, difteria, etc).
  • Grupo 2 -> residuos contaminados con heces de pacientes afectados de cólera o disentería amebiana.
  • Grupo 3 -> residuos contaminados con secreciones respiratorias de pacientes con tuberculosis o fiebre Q.
  • Grupo 4 -> filtros de diálisis de pacientes portadores de Hepatitis B, C o VIH.
  • Grupo 5 -> residuos punzantes o cortantes.
  • Grupo 6 -> cultivos y reservas de agentes infecciosos (ej: placas de Petri, hemocultivos, etc).
  • Grupo 7 -> residuos de animales infecciosos.
  • Grupo 8 -> recipientes que contengan más de 100 ml de muestras de sangre o productos derivados en cantidades superiores a 100 ml.
  • Grupo 9 -> cualquier resto anatómico humano reconocible como tal.

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Tipos de residuos y procedimientos de eliminación

Clases de residuos sanitarios

Clasificación de los residuos sanitarios:

• Clase IV -> cadáveres y restos humanos de entidad suficiente.
• Clase V (Residuos Químicos) -> residuos caracterizados como peligrosos según la legislación vigente y según la contaminación química que generen.
• Clase VI (Residuos Citotóxicos) Clase VII -> residuos contaminados por sustancias radiactivas.

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Tipos de residuos y procedimientos de eliminación

Gestión de residuos sanitarios

-Envasado:

• Los envases serán de un solo uso y no podrán volver a abrirse (si hay rotura o fuga se reenvasa).
• Los envases destinados a residuos Clase III y VI permanecerán intactos hasta su eliminación, sin someterse a presiones mecánicas. Los envases Clase II, III y VI se destinan a envases especiales:

Envases para residuos Clase II

• Opacos
• Impermeables / resist. humedad.
• Combustión sin emisión tóxica.
• Vol. no > a 70 L.
• Color verde.
• Galga mínima de 200.

Envases para residuos Clase III (*) - Opacos, NR (*); R o SR (*) - Impermeables / resist. humedad - Resistentes a la perforación. - Provistos de cierre hermético. (*) - Combustión sin emisión tóxica. - Vol. no > a 60 L ( *: No > 80L) (*) - Color rojo + "Biopeligroso".

Envases para residuos Clase VI Opacos, rígidos obligatoria/. - Impermeables / resist. humedad - Resistentes a la perforación. - Provistos de cierre hermético. - Combustión sin emisión tóxica. - Vol. no > a 60 L - Color azul + "Citotóxico".

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Tipos de residuos y procedimientos de eliminación

Gestión de residuos sanitarios

-Depósito intermedio

• Solo tendrá lugar en aquellas zonas dispuestas para ello. ·Dichas zonas deberán estar cerradas o bajo supervisión. Asimismo, deberán tener ventilación, ser de fácil limpieza y contener todos los productos y equipos necesarios para asegurar ésta.

Prohibido almacenar bolsas con residuos sanitarios directamente en el suelo. Prohibido mezclar bolsas de distintas clases (salvo Clases I y II).

• Las bolsas que se depositen en contenedores deberán separarse por clases (salvo Clases I y II). La evacuación y vaciado de los contenedores de residuos Biosanitarios y Citotóxicos debe realizarse al menos 1 vez al día.