Metabolismo microbiano y medios de cultivo para el crecimiento

Macronutrientes y Grupos Nutricionales

Macronutrientes Grupos nutricionales Micronutrientes Medios de cultivo para el crecimiento microbiano Reacciones Redox Forsforilafion oxidativa a nivel sustrato Metabolismo Microbiano Generacion de energia Fosforilacion Caracterizacion de la actividad - metabolica Amilasas Fermentacion Citocromo oxidasa - Reducción de nitratosGrupos nutricionales Micronutrientes Todos los nutrientes microbianos estan formados a partir de elementos quimicos

Composición de Macronutrientes

Macronutrientes - Proteinas - Carbohidratos - Lipidos Esta compuesto de: Carbohidratos Proteinas (aminoacidos) Lipidos H Ácido graso H H N c c H 0 C -E- I-U-I I-O-I H-C-H I-U-I I-O-I I-U-I I-O-I I-U-I I-O-I エ -U- エ I-U-I I-O-I Pero existen elementos que predominan en la estructura de dichos nutrientes, es decir que en la proteinas puede tener cualquier elemento de la tabla periodica, y para esto se clasifica.

Elementos Esenciales y Composición Celular

Trazas Pequeñas cantidades Grupo- 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 Periodo Esencial para todos los microorganismos 2 1 H He 5 6 7 8 9 10 B C N O F Ne 11 12 13 14 15 16 17 18 3 Na Mg Al S P S CI Ar 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 4 K Ca Sc Ti V Cr Mn Fe Co NI Cu Zn Ga Ge As Se Br Kr 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 5 Rb S Y Zr Nb Mo Tc Ru Rh Pd Ag Cd In Sn Sb Te 1 Xe 55 56 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 6 Cs Ba Lu Hf Ta W Re Os Ir Pt Au Hg TI Pb Bi Po At Rn (a) Elementos esenciales como porcentaje de peso seco de la célula Composición macromolecular de una célula Macromolécula Porcentaje de peso seco Proteínas 55 Lípidos 9,1 o 17 % S 1,8 % Polisacáridos 5,0 N 13 % Se <0,01 % H 8,2 % DNA 3,1 RNA 20,5 1 Cationes y aniones esenciales para la mayoría de los microorganismos 3 4 Metales traza (Tabla 3.1), algunos de ellos esenciales 2 LI Be No esencial, pero se metaboliza Cabeza hidrofilica O R HO Carbono Oxígeno Hidrógeno (b) (c) C 50 % P 2,5 % Lipopolisacáridos 3,4 Utilizado para funciones especiales No esencial, no se metaboliza

Macronutrientes: Fuentes de Carbono

Macronutrientes: Los microorganismos los requieren en mayor cantidad ¿Que Fuentes de Carbono podemos usar? -Sacarosa = Fructosa + Glucosa carbohidratos monosacáridos -Glucosa -Galactosa Disacaridos - Fructosa arabinosa - Lactosa = Glucosa + Galactosa - maltosa = glucosa - celabiosa = glucosa [ Almidón Polisacáridos Celulosa Proteínas - Extracto de carne Extracto de Levadura Peptona de carne (decase ina Lípidos 5099 Aceites maíz Canla Algodón

Micronutrientes y su Función Celular

Micronutrientes son elementos esenciales que los microorganismos requieren en pequeñas cantidades, pero que son fundamentales para su crecimiento, metabolismo y funciones celulares. -son vitales como cofactores enzimáticos, componentes de proteínas, o participan en el transporte de electrones.

Elementos y Función Celular

Departamento de Biología, Facultad de Química, UNAM Se hidrolizan as proteinas con. proteasas

Macronutrientes en Medios de Cultivo

Factores de Crecimiento Bacteriano

Los factores de crecimiento son compuestos orgánicos esenciales que algunas bacterias no pueden sintetizar por sí mismas, por lo tanto, deben obtenerlos del ambiente. Sin embargo, otras

Tipos de Bacterias según Factores de Crecimiento

Prototrofas Sintetizan sus propios factores de crecimiento

Auxotrofas Obtienen sus propios factores de crecimiento del medio ya que el no puede producirlos

Factores de Crecimiento: Vitaminas y su Función

Departamento de Biología, Facultad de Química, UNAM

Métodos de Cultivo Microbiano

Son una mezcla equilibrada de nutrientes que en concentraciones adecuadas y con condiciones fisicas optimas permiten un buen crecimiento de las bacterias

Criterios para un Medio de Cultivo Adecuado

1. Nutrientes adecuados
2. Humedad
3. pH
4. Temperatura
5. oxigeno

Objetivo: es ser una solucion rica en nutrientes para el crecimiento y multiplicacion de microorganismos en el laboratorio con el objeto de asilar diferentes especies bacterianas y proceder con su indentificacion

Conceptos Clave en Métodos de Cultivo

Bacterias que se introducen en el medio de cultivo se denominan inoculo

Metodos de cultivo

Las bacterias que crecen y se multiplican en un medio de cultivo. Se denominan cultivo

El medio que se va a sembrar, debe ser estéril, es decir, en un principio no debe contener microorganismos viables, de modo que sólo se desarrolle el inóculo

Clasificación de Medios de Cultivo

Clasificación por Composición

Composición Naturales o Complejos Sintéticos o químicamente definidos

Clasificación por Estado

Estado Líquido Fluido 0.1% de agar Semisólido 0.2 a 0.8% de agar Sólido 1.5 a 2% de agar

Clasificación por Uso

Uso Enriquecidos o nutritivos De enriquecimiento Selectivos Diferenciales De transporte De mantenimiento o conservación Pruebas Bioquímicas

Tipos de Medios de Cultivo por Composición

Medios Complejos

Complejos Composición indefinida, ya sea cuantitativa y cualitativamente, es desconocida

Puede ser Sangre Suelo Frutas extracto de levadura, peptonas el agua de la llave.

Medios Sintéticos

Composicion Composición completamente conocida, cuantitativa y cualitativamente sus componentes Sintesticos son extrapuros

El Agar en Medios de Cultivo

¿Que es un agar ? Es un polisacárido gelatinoso que se utiliza principalmente como agente solidificando en medios de cultivo para microorganismos. Se obtiene de algas rojas

Características del Agar

• No es nutritivo por si solo . Agar = base sólida inerte + nutrientes específicos = medio de cultivo sólido
• Se disuelven en agua caliente a 100 Cº
• Solidifica a 45C°
• . Es transparente, ñermitiendo ver el crecimiento bacteriano

Ejemplos de Agars

Chocolate (sangre de cordero) Soya tripticaseina Agar = base sólida inerte + nutritivo (para bacterias no exigentes) = medio de cultivo sólido sangre (para bacterias fastidiosas) MacConkey (selectivo y diferencial para Gram negativas) Sabouraud (para hongos) Propagación rápida y pruebas de bioquímicas

Medios de Cultivo según su Estado

Medios Líquidos y Fluidos

Liquido Fluido 0.1% de agar agar disminuye la velocidad de disolución del 02 ambiental.

Medios Semisólidos y Sólidos

Uso Estado Semisolido 0.2 -0.8 % de agar Motilidad, pruebas especiales Solido 1.5 a 2% de agar Aislamiento de colonias, cultivos, selectivo, diferencial cuatificacion, conservacion, y pruebas de sensibilidad

Medios de Cultivo según su Uso

Medios Enriquecidos o Nutritivos

·Enriquecidos o nutritivos (Usualmente solidos y puros ) Contienen componentes ricos nutritivamente lo que permite el crecimiento de microorganismos no exigentes (no son demandantes) . Agar cuenta estándar (cuenta en placa) . Agar-chocolate . Agar Soya Tripticaseína (TSA) .Agar nutritivo (AN) ·Agar sangre (AS)

Medios de Enriquecimiento

De enriquecimiento (Generalmente liq. Y mixtos) Contiene elementos que favorecen el crecimiento de un tipo específico de microorganismo y ralentizan el desarrollo de otros. ⁃ Caldo selenito · Caldo tetrationato ⁃ Agua peptonada

Medios Selectivos

Uso Selectivos Liq. O solidos, puros Tienen elementos que permiten el desarrollo de un tipo microbiano e inhiben el crecimiento de los demás microorganismos. · Caldo bilis verde - Agar pseudomonas · Agar rosa bengala ⁃ Agar centrimida

Medios Diferenciales

Diferenciales Tienen elementos que permiten identificar la actividad metabólica de los microorganismos. Para hacerlo, se usan indicadores o reveladores que muestran la actividad después de la incubación. ⁃ Agar DNasa · Agar de almidon - Agar cromogenico De conservación

Medios de Transporte

De transporte Son medios para el transporte de muestras sin alterar la viabilidad y la proporción de microorganismos. Tienen consistencia semisólida, con amortiguador de pH y reducidos en nutrientes para preservar la proliferación de microorganismos por varias horas.

Pruebas Bioquímicas: TSI

Uso Pruebas Bioquímicas (TSI) Tiene nutrientes para evidenciar la actividad metabólica de un microorganismo puro, especialmente bacilos Gram (-). Pueden emplear reveladores y/o indicadores.

Composición del Medio TSI

¿Qué contiene el medio TSI? - Tres azúcares: glucosa (0.1%), lactosa (1%), y sacarosa (1%). - Fuente de hierro: sulfato de hierro FeSO4 (para detectar producción de H,S). - Indicador de pH: rojo de fenol (cambia de color según la acidez). - Fuente de proteínas: peptonas.

Funcionamiento del Medio TSI

¿Cómo funciona? El medio tiene dos zonas: Culot (fondo del tubo, anaeróbico). Inclinación (parte inclinada, aeróbico).Inclinación Culot 1. Fermentación de glucosa, lactosa y/o sacarosa hace que el medio se torne amarillo (por producción de ácidos) 2. Producción de gas se ve por burbujas o fracturas en el medio. 3. Producción de H,S reacciona con el hierro y forma un precipitado negro en el fondo.

Interpretación de Resultados TSI

Inclinación Culot Gas H2S Interpretación