Metodologia diagnostica e rabbia: eziologia, patogenesi e vaccini

Metodologia Diagnostica

Colonie Teline

Copia animali vivono nello stesso ambiente
La condivisione

Patogenesi

Consulenza infettivolopi

• DIAGNOSI DI CERTEZZA
  La diagnosi eziologia
• MATERIALI PER LE INDAGINI :
  • TAMPONI SEMPLICI -> no soluzione di conservazione
    é sacco
    utili per DIAGNOSI MOLECOLARE
  • TAMPONI IN APPOSITI TERRENI DI TRASPORTO
    La gel di trasporto
    esame BATTERIOLOGICO -> ANTIBIOGRAMMA
    conservato 9 + 4℃, NO CONGELATO, NO SOLE
  • SANGUE INTERO IN EDTA -> ex. emocoltura di batteri
  • SIERO -> sprovviste di anticoagulante
    approccio molecolare per cercare patogeni, antigeni, DNA, RNA, anticorpi, etc ...
• PRELIEVO : - > DOPO ANAMNESI, SEGNALAMENTO, EOG e EOP -> scelta sito di campionamento
  • evitare stress e/o danni all'animale/operatore
  • conservato bene
  • di buona qualità
  • informazioni cliniche anamnestiche
  • panel diagnostico (può avere più course)
    e materiale

~ PERIODO DI INCUBAZIONE ~
da inizio replicazione a
insorgenza sintomi

Tecniche Diagnostiche

Tecniche Dirette

• COLTIVAZIONE DEL PATOGENO -> 7/8 gg - 1 mese
  per ricerca
• ESAME MICROSCOPICO -> a Presto, Gram,
  immunofluorescenza
• RILEVAZIONE DEL GENOMA >> RT-PCR, PER
• RILEVAZIONE ANTIGENI SPECIFICI -> test rapidi ->problema
  SUAP test
  ELISA

Esempi di Patogeni

RX. GATTO

• Calicivirus., rinotracheite virale, chlamidios:
• Panleucopenia feline
• Coronavirus enterico
• Peritonite infettiva felina UMIDA, SECCA, MISTA
• Protoparvovirus emergenti
• Leucemia Pelina
  EX. CANE
• Enteropatagoni vivosi emergenti
• Parvovirus:
• Adenovirus 1, 2
• cimurro
• Leptospirosi

Tecniche Indirette

• RISPOSTA IMMUNITARIO PATOGENO
  La siero conversione
  Iga - IgM
  Attenzione e IMMUNITÀ PASSIVA MATERNA
  PRESENZA ANTICORPI VACCINALI
  INFEZIONI PREGRESSE

-> vaccino ricombinante
Li solo patto (leucemia felino) e coniglio

• vaccini deleti
  Carinotracheite infetivo bovina
  La glicoproteina E
• vaccini epatite B con proteina 5
  sensibilità
• Organizzare piani di MONITORAGGIO/
  SORVEGLIANZA per attivare/implementare
  specifiche misure di PROFILASSI
  . IRACCORATO DI POLLO ES VIRUS ALId.
  DECOLI, ETANOLO 70% -> envelope
• DIRETTA -> uccisione patogeno
  ex. igienico- sanitaria
  detersione disinfezione quarantena
  o isolamento
• INDIRETTA -> risposta immunitario
  ex. vaccinazione
  valutare sensibilità per antibiotico
  Sensibile, Resistente, Inerte
  in quar è MIC (Concentrazione
  Minima Initente)

PCR

• PCR -> Reazione a catena della polimerasi
• Risospensione del tampone (PBS, terreno di cottura o acqua per preparazioni iniettabili)
• ESTRAZIONE degli acidi nucleici
• PCR O RT-PCR
  -> termociclatore
  DNA polimerasi
  DUTPS (basiazotate)
  PRIMER (20-23 bosi) -> complementare alle bosi del frammento target

1
3 FASI
1. FASE DI DENATURAZIONE "> DNA si apre
Per 25 ~ 40 cicli
2° FASE DI IBRIDAZIONE
-> primer vanno a legarsi
3 FASE DI ESTENSIONE
-> DNA polimenosi si attiva
La crescita
logaritmica
Se RNA -> preceduta da uno fase di RETROTRASCRZIONE grazie all'enzima RETROTRAZURITA
(50-60min)

Immunofluorescenza

• IMMUNOFLUORESCENZA -> tecniche sierologiche
  J
  DIRETA
• antigene corpuscolato ignoto
  INDIRETTA
• anticorpo con fluorescina
• antigene /anticorpo ignoto
• antigene noto > immunocomplesso
• antisiero anti- immunoglobuline con fluorescina

ELISA e Sieroneutralizzazione

• ELISA -> utiliza anticorpi marcati con un enzima (ex. perossidasi)
• SIERONEUTRALIZZAZIONE VIRALE -> ricerca anticorpi neutralizzanti contro virus

Tipi di Vaccini

Vaccino Vivo Attenuato

I TIPI Di VACCINI

• VACCINO VIVO ATTELNATO -> capacità replicativa
  attivazione immunità cellulo-mediata
  più immunogeno
  risposta immunitarie di più lunga durata
  -> SVANTAGGIO -> virulenza residua
  eliminato in ambiente
  NO in previdenza (può attraversare placenta)

Vaccino Inattivato

• VACCINO INATTIVATO -> NO REPLICAZIONE
  meno immunogeno
  risposta immunitario breve
  richiamo con frequenza (~ 1 ANNO)
  usato per ZOONOSI

Vaccino Ricombinante

• VACCINO RICOMBINANTE -> usato per agenti patogeni che in vitro non replicano
  Ly epatite B
  prodotte più proteine di virus diversi
  Ly non cerco proteinos
  ma Core
  gene più immunogeno inserito in un PLASMIDE + PROMOTER
  di sintesi proteica -> PROTEINA RICOMBINANTE IMMUNOGENA
  inseriti in virus grandi (ex. vaidosi)importante per leucemia Pelina virale (Caranypox virus) aconiglio

Vaccini Vivi Attenuati Deleti

• VACCINI VIVI ATTENUATI DELETI -> per virus erpetici
  S rinatracheite infettivo bovine
  > dicoproteina €
  tecnica mutagenesi impediscono espressione
  tagli e cuci del genoma

Vaccini Purificati a Subunità

• VACCINI PURIFICATI A SUBUNITÀ -> uso antipene più immunogeno
  da virus da campo per purificazione o del gene
  molto ADIUVANTI -> reazioni post- vaccinoli
  - locali
  - generalizate -> shock anafilattico

Vaccini Termosensibili

• VACCINI TERMOSENSIBILI -> inattivati a 37°℃
  Chlamydia abortus
  limitare denni
  24. 80%. Rano
  10% ?

Vaccinazione

• VACCINAZIONE
  -> primo valutare stato anticorpole -> test. emoapplutinazione -> subito me!
  1
  poiché si verano non si
  SUAP text -> problema SENSIBILITÀ
  PCR -> più sensibile e rapido
  Nel care si vaccina e serve diagnosi diretta per :
  1
  cercano de
• PARVOVIRUSI
  vivo attencuanto
  1
• ADEROVIRUS -> CAV-1 epatite infettive di Rubarth ?
  vaccinazione eterologa con CAU-2
  CAU-2 CIRD
  CAU-1 -> ipersensibilità 3 tipo
• CIMURRO -> vaccinazione diretta, vivo attenuato
  inutile cercare AC
  6 mesi
  1 ans
• LEPTOSPIROSI -> Zoonosi -> imotivi, sporti (La 0 44)
• ENTEROPATOGENI VIRALI EMERGENTI -> non replicano in vitro
  difficile cercare Ac -> metodologia molecolare
  non esistono vaccini
  Vaccinazione idiretto SCONSIGLIATA
  La interferenza immunità passiva mamma
  anticorpi vaccinal.
  infezioni pegresse

Gastroenterite Emorragica del Cane

Definizione

GASTROENTERITE
EMORRAGICA DEL CANE
DEFINIZIONE: è una malattia infettiva altamente contagiosa, caratteriZzata generalmente da DIARREA EMORRAGICA
VONITO INCOERCIBILE e morte dell'animale dopo 24-72h dall'inizio dei primi sintomi

Eziologia

• EZIOLOGIA
  Pam. Parvoviridae
  sottofam. Parvovirinae
  genere Protoparvovirus
  specie
  Carnivore protoparvovirus 1
  virus
  Canine parvovirus 1 (CPV-2)
  virus della panleucopenia felina (FPV)
  P. enterico del visone (MEU)
  P. del procione (RaPV)

Ipotesi Origine

• IPOTESI ORIGINE
  FPV esisteva già -> da FPV O da vaccino
  stretta correlazione antipanico - IDENTITÀ AMMINOACIDICA
  95% -> sostituzione di & AA nel dominio di UP2
  per interazione recettore transferrina
  > molto piccolo

Struttura del Virus

• struttura icasaedrica ($ 18-25nm)
• capside di 60 copie di VRI + VPZ (fuori)
• NO ENVELOPE
  V
  90%
• UP2 ha gli epitopi immanodominanti e
  interazione virus-cell
• DIA MONOCATENARIO
• 2 ORF -> ORF & non tutte proteine strutturali
• stabile azione temp
  . sensibile a IPOCLORITO DI SODIO, NOCH
  Beta - propriolaHone
• EMOAGLUTINA GR di sulino, scimmia,
  gatto a + 4℃
• REPLICA IN CELI IN ATTIVA REPLICAZIONE
  . in laboratorio > ciFIK cell renali patto
  A72 cell fibroma cone
  tramite ospite selvatico -> rinvenuti IPulike e cpv-like
  (procione, volpe artica, lince, puma) carnivori selvatici

Caratteristiche Antigeniche

• CARATTERISTICHE AUTIGENICHE
  Migliai di ceppi ma SIEROTIPO UNICO
  180 2 varianti -> cpv-2a
  CPV-26
  Cpu - 2C -> uniBa '00
  -
  differiscono per 6 sostituzioni AA
  e tra di loro per 1 in posizione 426
• NO DIFFERENZE SINTOMATOLOGICHE
• ANTICORPI MONOCLONALI PER DISTINGUERLE
  CPV-2 NON ESISTE PIÙ
  solo in vaccini
  È a DUA per cui stabile
  mo si comporta up po'
  come RUA
  ->
  tipo mutazioni
• duplicazione perfetta
  con alto grado di imperfezione
  -
  10
  quasispecie

Epidemiologia

• EPIDEMIOLOGIA
  . In Italia molto diffusa
  L>20-20
  2b uta diminuendo (in alcuni vaccini)
  . CPU-20 in molti paesi europei

Recettività e Trasmissione

• RECETTIVITÀ
  sensibili cane, gatto, coyote, procione,
  dingo, lupo
  CPU-2a, b, c si
  CPV-2 NO
• TRASMISSIONE
  . Diretto o indiretto -> elimino in escreti e secreti -> necessita di CARICA VIRALE BASSA
  -> oro-fecale
  Ly anche prima dei sintomi

Patogenesi della Gastroenterite Emorragica

• PATOGENESI
  Penetrazione -> incubazione 3/5g
  linfonodi faringei
  Placche di Peyer
  distretti linfatici
  (milza, timo, linfonodi)
  1
  INTESTINO TENUE
  -> MIOCARDIO
  1
  lascio di His
  cripte ghiandolari del duodeno
  villi del digiuno e dell'ileo
  DIARREA

Forme Cliniche

• FORME CLINICHE
• CARDIACA -> miocardite acuto, fibrilla.
  extrasistole
  - fatale per cuccioli di 4-6 10.
  - in cuccioli senza Ac materni
  - Para
• DIGESTIVA -> tipica , DIARREA
  EMORRAGICA, DEPRESSIONE SENDORIO,
  VOMITO, DISIDRATAZIONE, ODORE
  NAUSEABONDO FECI, LEUCOPENIA
  (<3.000 / mm3)
• ASINTOMÁTICA -> depressione do
  anoressia
  Nelle forme atipiche essenziale
  il laboratorio

Diagnosi Differenziale

• DIAGNOSI DIFFERENZIALE
• turbe enteriche legate allo svezzamento "> NO DIARREA EMORRAGICA, NO FEBBRE
• avvelenamento da anticoagulanti -> sensibili a vit.K e antidoti specifici
• intestazioni da ascaridi e coccidi -> esame feci
• infezioni batteriche -> antibiotic
• infezioni virali -> CIMURRO a pochi sint. enterici, sintomi nervosi
  -> EPATITE INFETTIVA -> diarrea (rano emorragica), ittero, lesioni corneal:
  -> ENTERITI -> diarrea striata di sangue, benigno, conta leucocitaria

Diagnosi di Laboratorio

• DIAGNOSI LABORATORIO
  - test EMOAGGIUNTINAZIONE -> diretto, dù sorta di titolo
  (-> minore SENSIBILITÀ
  ex. se IOAs, impediscono
  lettura, feci diluite

Profilassi Attiva

• PROFILASSI ATTIVA - INDIRETTA
  - VACCINI INATTIVATI -> particolari situa (immunodepressi: cucidi gravidanza)
  - VACCINI ATTENUATI -> di routine (CAV-2, cpu-2b)
  - VACCINI ALTO TITOLO > aggirare EFFETTO BLANKETINCI -> Pino 12°-14°W. presenti
  -> monovalenti o bivalenti
  (CIMURRO)

Protocollo Vaccinale

• PROTOCOLLO VACCINALE
  - dalla for VACCINO ALTOTITOLO
  tradizionale
  - dopo 21-28pp RICHIAMO -> (PVZ, CDU, CAJU, PI
  - dopo 21 -20gg RICHIAMO
  - dopo 1 anno
  - dopo ogni 3 anni
• il gatto non viene vaccinato per CPU-Z !
  Pino 6° protettivi (1:80-1:160)
  dopo SCENDE Sotto 1:80
  - FINESTRA DI SENSIBILITÀ

Nuove Scoperte

• NUOVE SCOPERTE
  Nuovi Parvo (2018) in lontra e cone
  coppi umani in
  La Camine balavirus
  Burkina Faso
  La in coni con enteriti e sintomotolog.
  respiratoria
  La in cina anche nel siero (viremia)
  L> Canine chaphamaparvovirus 1
  genere ù infetta vertebati che invertebrati
  Sottofom. Hamaparvovirus
  - test IMMUNOCROMATOGRAFICO /SNAP -> diretto, rapido
  - PCR O RT-PCR

Herpesvirus Canino Tipo 1 - CHV-1

Eziologia

• EZIOLOGIA
  Fam. Herpesviridae
  Sottofram Alphaherpesvirinae
  Genere Varicellavirus

Caratteristiche del Virus

• forma sferica (120-150 mm)
• envelope
• Spikes - peplomeri -> glicoproteine immunogene
• DUA a doppio filamento di 128 Kbp
  La capacità replicare autonomo
  ha la DNA polimerasi che va nel nucleo o
  anche nel citosol
• 51% analogia genetica con FHV-1
• UNICO SIEROTIPO
• CRESCITA OTTIMALE A 34-35ºC
• Alcuni tendono a clusterizare
  - EHV-1, EHV-4, EHV-3 degli equidi
  - BOHV . 1 , BOHVS
  dei bovini
  - CHV, FHV-1 -> identità nucleotídica /amminoacidica tra 50-52%
  ma non c'è rischio di trasmissione interspecifica cane-gatto

Meccanismo di Protezione

• MECCANISMO DI PROTEZIONE
  LATENZA -> localizzazione del PROVIRUS (penomo) all'interno di alcune cellule sottoforma di
  PLASMIDE EXTRACROMOSOMIALE -> può riprendere replicazione autonomamente.
  # INTEGRAZIONE -> HIV (Retroviridae, Lentivirus)
  NON è CIRCOLARE
  SLATENTIZZAZIONE -> riattivazione in particolari condizioni -> fattori stressanti (+ cortisolemio)
  uso cortisonici
  superinfezioni
  parto, gravidanza (squilibrio ormonale)

Epidemiologia

• EPIDEMIOLOGIA
  . diffusione COSMOPOLITA
• Europa -> prevalenza fino 80%
• Italia -> sieropositivitrà tra 6% e 30% (dipende da come sono stati svolti gli studi)
  -> problema -> condizioni igieniche
  souraffollamento

Eliminazione e Persistenza

• ELIMINAZIONE
  - ESCREZIONI NASALI > fino a 15gg dopo
  CIRD
  più è adulto più è asintoma
  - ESCREZIONI VAGINALI -> fino a 16gp femmina
  lino a 20 g maschio
  - FETO ED INUOGLI FETALI IN CASO DI ABORTO
  - ESCREZIONI DA CUCCIOLI INFETTI -> VIREMIA
  (saliva, lacrime, urina e feci)
• PERSISTENZA
  IMMUNITÀ DI BREVE DURATA -> aumento titoli anticorpoli 7-14gg dopo infezione primaria
  1
  e persistenza per 8 mesi
  tutto ciò che rimane localizzato La riattivazione un aumento in 4-5gg e poi declino
  é più difficile
  forse No 30H
  in poche settimane
  da combattere
  Lacell me

Patologie Riproduttive

Le patogie della sfera riproduttivo comportano
noteudi problemi nell' allevamento canino.

• Mancato concepimento
• Riassorbimento- ABORTO
• Mortalità perinatale e neonatale

Cause di Patologie Riproduttive

• SOITOF
  - ALPHA
  CAUSE
  NOW INFETINE
  INFETTIVE
  . BHV
  - traumi
  - CHV-1
  . SHV-
  - farmaci
  - Brucella canis
  . EHV
  - fattori ormonali
  - Toxoplasma por
  - fattori genetici
  - Lespara conis
  - Infezioni batteriche
  - BETA HE
  serenivito cellulare
  (librobiosti)
• Cytomegalovirus del
  bovino e del cavalo
• Rinite a corpi inclusi
  (suino)
  laterizo ph. salivari e
  reni
• GAMMAHERPESVIRINAE -> crescita lento in
  cell linfordi
  1
• Malattia di Marek
• Febre catarrale Maligna alcuni cri ogeni
• Adenomatasi polmonare
• FAV-

Trasmissione

TRASMISSIONE
ADULTI -> via ono-nasale
via venerea
CUCCIOLI -> via transplacentare (durante ultima settim.)
canale del parto
ingestione o inalazione materiale infetto