Inmunohematología y hematocompatibilidad: conceptos de grupos sanguíneos

Técnico Superior en Laboratorio Clínico y Biomédico

MP. Análisis Hematológico

UD9. - Inmunohematología y hematocompatibilidad

Análisis Hematológicos

Unidad 9. Inmunohematología y hematocompatibilidad

Índice

1. Introducción. .3
2. Grupos sanguíneos 4
3. Patologías relacionadas con la hemocompatibilidad 15
4. Técnicas para el estudio de la hemocompatibilidad 22
5. Pruebas de hemocompatibilidad 26
6. Pruebas inmunohematológicas diagnosticas 30

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1. Introducción a la transfusión sanguínea

La transfusión es un procedimiento mediante el cual se pasa sangre, o alguno de sus componentes, de un donante a un receptor. Un factor determinante para poder realizar una transfusión es la compatibilidad entre donante y receptor, para que no se produzca una reacción inmunológica entre antígenos (Ag's) y anticuerpos (Ac's) de donante y receptor. Por ese motivo se analiza la inmunohematología, mediante pruebas de hemocompatibilidad. Uno de los procedimientos más utilizados es la determinación de los grupos sanguíneos de los eritrocitos. En esta unidad se estudiarán en detalle los sistemas ABO y Rh y las técnicas de determinación de los mismos. Además, se enumerarán diversas patologías relacionadas con la hematocompatibilidad.

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2. Grupos sanguíneos

2.1 Introducción a los grupos sanguíneos

Los llamados grupos sanguíneos se refieren a un conjunto de proteínas y polisacáridos que se encuentran, fundamentalmente, en la membrana de las células sanguíneas y que les dan especificidad de grupo. Son de carácter antigénico y, por lo tanto, también existen anticuerpos capaces de reaccionar contra ellas. Cada individuo posee unos determinados antígenos que le son transmitidos genéticamente por sus progenitores. Dichos antígenos permanecen estables y constantes durante toda la vida de la persona. Al grupo de antígenos situados sobre las membranas de las células hemáticas se les denomina "sistema de grupos sanguíneos".

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2.2 Conceptos fundamentales sobre inmunohematología

La inmunohematología es la parte de la hematología que se ocupa del estudio de los grupos sanguíneos de los hematíes, leucocitos y plaquetas, y de las reacciones inmunológicas relacionadas con ellos, aunque, en general, cuando se habla de grupos sanguíneos se hace referencia a los eritrocitarios, porque fueron los primeros conocidos y son los más importantes en la transfusión sanguínea. De cara al estudio de los grupos sanguíneos es imprescindible recordar algunos conceptos:

• Antígeno (Ag): molécula capaz de producir una respuesta inmune y de reaccionar con los anticuerpos formados específicamente en el respuesta inmunitaria.
• Anticuerpos (Ac) o inmunoglobulinas (lg): sustancia que elabora el organismo como respuesta al contacto de antígenos y que reaccionan específicamente contra ellos. Los anticuerpos de mayor importancia en las reacciones debidas a transfusiones son de tipo IgG e IgM, rara vez IgA:
  • IgG: pueden fijar el complemento. Debido a su tamaño, pueden atravesar la barrera hematoplacentaria y provocar la enfermedad hemolítica de recién nacido (EHRN), que estudiaremos más adelante.
  • IgM: son aglutininas (anticuerpo que provoca aglutinación de las células) muy potentes, y algunas activan el complemento eficazmente. Tienen forma de pentámero y un alto peso molecular, por lo que no pueden atravesar la barrera hematoplacentaria.
  • IgA: están presentes en secreciones. En el plasma se encuentran en forma de monómeros y en las secreciones en forma de dímeros.

Y Monómero IgD, IgE, IgG Dímero IgA Pentámero IgM Martin Brandli 06

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• Aglutinación: es el agrupamiento de los hematíes u otras partículas al reaccionar un antígeno presente en ellos con el anticuerpo específico que los hace agruparse y formar grumos que pueden ser visibles macroscópicamente. La aglutinación puede presentarse en diversos grados de reacción.
• Hemólisis: es la destrucción de los hematíes por la unión al anticuerpo específico en presencia del complemento. Es causado por enfermedades autoinmunitarias, infecciones, falta de proteínas en los glóbulos rojos, efectos secundarios de medicamentos o reacciones a transfusiones sanguíneas entre otros.

2.3 Grupos sanguíneos eritrocitarios

Las reacciones de aglutinación son el fundamento de las pruebas de laboratorio para la investigación de grupos sanguíneos. Existen numerosos sistemas de grupos sanguíneos relacionados con los eritrocitos, que vienen determinados por diferentes Ag que están situados sobre si membrana citoplasmática, y que han sido estudiados y clasificados por diferentes autores. De todos ellos, los más importantes son los Ag del sistema ABO y los del sistema Rh, y en segundo lugar los Ag de los sistemas Kell, Duffy, Kidd, Lutheran, Lewis, MNSs, P, I, etc.

N-ter ABO Hh MNS KELL Duffy Ter-N Ter-C Ter-N N-glícano GPI-anclas Ter-C Ter-N Ter-N C-ter C-ter Proteínas de un solo paso Proteínas de paso múltiple Membrana eritrocitaria con los diferentes antígenos.

2.4 Sistema ABO

En el sistema ABO los antígenos que determinan el grupo sanguíneo son cadenas cortas de oligosacáridos (carbohidratos) unidas a esfingolípidos de la membrana eritrocitaria (ceramida), que sobresalen hacia el exterior de los hematíes. Los tres antígenos que

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caracterizan a este sistema tienen una parte común y se diferencian solo en el residuo terminal de la cadena. La expresión de estos antígenos está controlada por dos genes: el gen H (cromosoma 19) y el gen ABO (cromosoma 9), que codifican para enzimas glicosiltransferasas. A partir de un oligosacárido precursor común, la transferasa H cataliza la incorporación de una L- fucosa, generando el antígeno o sustancia H, que es la base para la síntesis de los antígenos A y B. El grupo ABO se hereda mendelianamente, cada individuo tiene dos alelos para el gen ABO, uno del padre y otro de la madre. Esto constituye el genotipo, el fenotipo viene determinado por los antígenos expresados en la superficie de los hematíes. Los alelos A y B son codominantes entre sí y dominantes sobre el O. El gen ABO tiene 3 alelos:

• Alelo A: codifica para la transferasa A, que cataliza la adición de un residuo de N-acetil-galactosamina al antígeno H, originando el antígeno A.
• Alelo B: codifica para la transferasa B, que incorpora un residuo de D- galactosa al antígeno H, dando lugar al antígeno B.
• Alelo O: codifica para una proteína sin actividad glicosiltransferasa y que no puede modificar la sustancia H, por lo tanto, se queda solo la sustancia H (antígeno H).

Cada individuo posee 2 cromosomas 9 (uno del padre y otro de la madre), que se combinan de modo que podemos encontrar los genotipos AA, AO, BB, BO, AB y OO, procedentes de las combinaciones del alelo "A", el alelo "B" y el alelo "O".

Grupos sanguíneos

Dependiendo del antígeno o antígenos presentes en la superficie de los hematíes, se diferencian cuatro grupos sanguíneos en este sistema:

1. Grupo A: los hematíes presentan antígeno A.
2. Grupo B: los hematíes presentan antígeno B.
3. Grupo AB: los hematíes presentan antígenos A y B.
4. Grupo O: los hematíes presentan solo antígeno H (no tienen antígeno A ni antígeno B).

Los hematíes de los grupos A, B y AB tienen también en superficie el antígeno H, aunque en menor proporción que los del grupo O. No toda la sustancia H es transformada en antígeno A o B.

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GRUPO SANGUÍNEO	ANTÍGENOS (Fenotipo)	GENOTIPO
Grupo A	Antígeno A y H (poco)	AA, AO
Grupo B	Antígeno B y H (poco)	BB, BO
Grupo AB	Antígeno A, B y H (poco)	AB
Grupo O	Antígeno (o sustancia) H

Anticuerpos del sistema ABO

Los anticuerpos del sistema ABO tiene un gran interés transfusional, ya que aparecen en el suero de la persona de forma natural desde los primeros meses de vida. Actúan frente a los antígenos que no poseen en sus hematíes. Se desarrollan aglutinina completas naturales del tipo IgM muy potentes contra los antígenos eritrocitarios. Contra el Ag A la aglutinina anti-A y contra el Ag B la aglutinina anti-B. También puede ser del tipo IgG, aunque poco frecuente y generalmente producidas por individuos del grupo O.

• Si una persona es del grupo A, en su suero se detectan anticuerpos anti-B.
• Si es del grupo B, en su suero se detectan anticuerpos anti-A.
• Si es del grupo O, en su suero se detectan anticuerpos anti-A y anti-B.

Grupo A	Grupo B	Grupo AB	Grupo O
Glóbulo rojo	A	B	AB
Antígeno	A	B	y 1 Ay B	Ninguno
Anticuerpo	Anti B	Anti A	Los dos

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Subgrupos de A y B

Se han descrito varios subtipos dentro del sistema ABO, hablándose de subgrupos o variantes. Son debidos a mutaciones en el gen ABO que alteran la eficiencia de la transferasa codificada o modifican su afinidad por el sustrato sobre el que actúan. De esta forma, la mayor parte de los subgrupos de A y B son variantes cuantitativas, que presentan menor cantidad del antígeno A o B sobre la membrana de los hematíes. Hay también alguna variante cualitativa que afecta a la estructura antigénica, sobre todo al grado de ramificación del antígeno. A1 es el subgrupo mayoritario (80%) en los individuos tipo A. Otros subgrupos de A incluyen A2 (19%), A3, Ax, y Ael. Del mismo modo, B (B1) es el más común entre los individuos B, y otros subgrupos B son B3, Bx, y Bel. Los grupos A y B débiles, tienen gran importancia transfusional porque no aglutinan con los antisueros convencionales anti-A y anti-B, y en la prueba celular pueden ser erróneamente identificados como O, por lo que en algunos casos se usan métodos moleculares para tipar estos subgrupos. Para diferenciar entre A1 y A2, el grupo A2 presenta menor cantidad de antígeno y está poco ramificado, mientras que el A1 está muy ramificado, se pueden diferenciar por aglutinación con una lectina, A1 aglutinará y A2 no.

Grupo Bombay

Con relación al sistema ABO, hay que mencionar un grupo muy poco frecuente denominado Bombay (grupo Oh), donde se descubrió. Las personas que pertenecen a este grupo poseen dos alelos recesivos del gen H (hh) por lo que carecen de esterasa H, no pueden producir sustancia H, y por tanto, tampoco antígenos A ni B. Fenotípicamente, con la prueba celular estas personas se clasifican como grupo O, pero cuando se analiza su suero (prueba sérica) se obtiene una fuerte aglutinación con hematíes de todos los grupos, incluidos los del grupo O. Esto es debido a que los individuos O Bombay poseen anticuerpos anti-A, anti-B y anti-H, y la sustancia H no está presente como antígeno en los hematíes.

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